医学动态成对关联刺激对脑梗死大鼠神经

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作者信息：鲁银山1，2、张秀娟1，3、郭铁成1、胡艳1，4、张香玉1，5、张松1、

1华中科技大学同医院康复医学科武汉；2医院康复医学科武汉；3医院康复医学科成都；4医院康复医学科武汉；5医院康复医学科郑州

通信作者:郭铁成Email:pmr

tjh.tjmu.edu.cn

目的：观察成对关联刺激(PAS)对脑梗死大鼠神经功能损伤恢复的影响并从神经元自噬的角度探讨其作用机制。方法健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，随机选取20只纳入假手术组(n=20)，另40只大鼠采用经典线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型，并按随机数字表法分为模型组和治疗组(各20只)。治疗组自术后1d起进行为期14d的PAS治疗模型组和假手术组不给予任何干预。分别于术后第1、7和14天对各组大鼠进行改良神经功能缺损程度量表(mNSS)评分和提尾试验(EBST)评分；于术后第7天和第14天的治疗结束后行脑组织取材以Westernblot法检测缺血半暗带区LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin1和CathepsinB蛋白含量；免疫荧光双重染色法观察缺血半暗带区LC3与NeuN的共表达情况。

结果：①术后第7天和第14天模型组和治疗组的mNSS和EBST评分均高于假手术组(P0.05)而治疗组mNSS和EBST评分均低于同时间点模型组(P0.05)且治疗组术后第14天的mNSS评分低于术后第7天(P0.05)；②术后第7天和第14天治疗组和模型组的LC3Ⅱ/Ⅰ比值均较假手术组高(P0.01)且治疗组的LC3Ⅱ/Ⅰ比值较同时间点模型组低(P0.05)；模型组和治疗组的Beclin1蛋白含量较假手术组高(P0.01)而治疗组Beclin1蛋白含量在术后第7天和14天均较同时间点模型组低(P=0.P0.01)；模型组CathepsinB含量较假手术组高(P0.05)治疗组CathepsinB含量亦较假手术组高(第7天时P0.05第14天时P=0.)术后第14天治疗组的CathepsinB含量较同时间点模型组低(P0.01)；③模型组和治疗组缺血半暗带区的LC3阳性细胞数均较同时间点假手术组显著增加(P0.01)且治疗组较同时间点模型组减少(P0.05)；模型组和治疗组LC3阳性表达的神经元数量与神经元总数量的比值均较同时间点假手术组显著增加(P0.01)且治疗组较同时间点模型组减少(P0.05)。

结论：PAS治疗可抑制脑梗死大鼠缺血半暗带区神经元的自噬活性促进大鼠脑梗死后神经功能损伤的恢复。

脑梗死；成对关联刺激

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以下是正文

脑卒中是一种高致残率的疾病其遗留的各种功能障碍严重影响患者的生活质量和工作水平。缺血性脑卒中(ischemicstroke)是主要的脑卒中类型之一。研究表明缺血所致神经细胞死亡的形式除凋亡(apoptosis)和坏死(necrosis)外还有第三种类型的死亡即自噬(autophagy)其在缺血性脑损伤中起着重要作用。

自噬与神经元的存活密切相关。正常生理情况神经元的自噬维持在相对较低的水平有利于维持内环境的稳态。脑缺血情况下神经元自噬轻度激活有助于促进蛋白质周转和能量的保留；而长时程、难以控制的高活性自噬会吞噬神经元胞质内的关键成分和生长因子可加速神经元的死亡。因此调节神经元自噬水平对于脑缺血性后神经元的存活以及神经功能康复具有重要意义。

近年来成对关联刺激(pairedassociativestimulation，PAS)作为一种新兴的无创性脑卒中康复治疗手段受到了

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